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  • 基因突变文库合成
    基因突变文库是大量DNA变体序列的组合,是基因合成、基因突变和定向进化研究相结合的产物。通用生物提供的基因突变文库服务,可根据您的要求仅突变指定的氨基酸或核苷酸序列,同时保证文库的容量、多样性和完整性,可用于蛋白抗体文库的构建与筛选。

    可提供突变引物库种类:


    Trimer简并引物

    使用单一核苷(monomer)合成的简并引物,在突变位点会不可避免的产生冗余突变和终止密码子。将三个核苷按固定顺序连接起来所形成的三联核苷(Trimer Phosphoramidites)可以对应单一的氨基酸。以Trimer混合物作为元件设计的简并引物,能够保证突变位点的氨基酸按照设计的比例构成,满足特定位点的氨基酸多样性和偏好性。

    Trimer与氨基酸对照表

    Amino Acid
    Abbreviaiom
    Lys
    K
    Asn
    N
    Thr
    T
    Ile
    I
    Met
    M
    Gln
    Q
    His
    H
    Pro
    P
    Arg
    R
    Leu
    L
    Glu
    E
    Asp
    D
    Ala
    A
    Gly
    G
    Val
    V
    Tyr
    Y
    Swr
    S
    Cys
    C
    Trp
    W
    Phe
    F

    示例:

    5GCAACTTATTACTGTCAGCAA(X)5-8CYGWTCACGTTCGGACAGGG3

    X Trimers=Y(50%)/S (10)/G(10)/A(5)/F(5)/W(5)/H(5)/P(5)/V(5)


    IUBcode简并引物

    通过混合2-4种碱基,核苷代码由单一的A、T、C、G拓展到R、Y、......N11种混合核苷代码(IUB code)。使用IUB code构建不同的密码子组合,可以在突变位点形成固定氨基酸的组合。

    IUBcode密码对照表

    IUBcode
    Mixed Bases
    R
    A、G
    Y
    C、T
    M
    A、C
    K
    G、T
    S
    C、G
    W
    A、T
    H
    A、C、T
    B
    C、G、T
    V
    A、C、G
    D
    A、G、T
    N
    A、C、G、T


     

    NNK简并引物

    NNK简并密码子包含了32种密码子组合,覆盖了所有20种氨基酸残基,是构建文库常用的简并密码子。

    示例

    5GGCCCTAACGGATAACCG(NNK)6GCCAATTCATGCACCTTACG3

    N=A/C/G/T, K =G/T


    服务优势
      1. 1、无需DNA模板,只需提供序列信息
      2. 2、超高的突变精确性、更丰富的文库多样性
      3. 3、更大的文库容量,更高的筛选成功率
      4. 4、获得利用传统突变方法无法获得的基因变异体
    服务说明
      质量控制:
      1、线性DNA文库:PCR产物文库,将该文库连接至特异性载体上,随机挑取12-96个克隆测序,从而确定该文库的多样性和准确率
      2、质粒DNA文库:将线性DNA文库装至客户指定载体上所得到的克隆文库,随机挑取12-96个克隆进行测序,从而确定该文库的多样性和准确率
    服务流程
      文库设计---突变引物库合成----质粒DNA文库构建(或线性DNA文库构建)----质量控制----交付质粒DNA文库或线性DNA文库。
    服务订购
    1、1-2μg线性DNA文库或5-10μg质粒DNA文库的冻干样品
    2、发送文件,包括原始测序谱图、QC文件(线性DNA文库或质粒DNA文库电泳图、酶切图和序列比对图)以及COA文件
    订购信息
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